Chromatography

固相微萃取

固相微萃取 (solid phase microextraction, SPME)
國立臺灣師範大學化學系學士班 俞姿宇

固相微萃取(SPME, 讀做”spee-mee”)是一種重要的樣品前處理方法,可以與多種分析儀器串聯使用2,像是在氣相層析儀 (gas chromatography, GC)、質譜等分析儀器的進樣。SPME 優於一般傳統的萃取方法就是不需要使用溶劑,成本低廉,萃取時間短、樣品需求量少,而且可應用在食品、環境分析,不論是否揮發的物質都能使用,靈敏度高,偵測極限可達 ppb。此方法由加拿大滑鐵盧大學 Pawliszyn 教授在 1989 年發表,將採樣、萃取、濃縮、進樣整合成單一步驟即可完成,萃取裝置很簡單,如圖一,外觀像一個針筒,但是在接觸樣品的前端是熔融矽纖維,纖維上塗覆 10 μm – 100 μm 的固定相,暴露在樣品中,等待分析物吸附上去。纖維若無損壞可重複使用。1

凡第姆特方程式

凡第姆特方程式 (Van Deemter Equation)
國立臺灣師範大學化學系學士班 俞姿宇

使用管柱層析的過程中,樣品進入管柱後,成帶狀前進,在管柱裡因擴散漸漸變寬,凡第姆特方程式是描述管柱中的擴散情況的實驗式。

分子在靜相與動相間作用,作用力的大小影響移動速度,通過管柱抵達偵測器的時間,稱為遲滯時間 (retention time, \(t_R\)),遲滯時間是一種物質的重要指標,理想上希望峰越窄越集中,得到一個左右對稱的細長峰型。

氣相層析

氣相層析 (Gas Chromatography)
國立臺灣師範大學化學系 黃仲楷

簡介

氣相層析 (gas chromatography, GC) 在有機化學中,是一種用於分離、純化易揮發、熱穩定性佳化合物的技術。1與其他層析法相同,都是藉由動相 (mobile phase) 和靜相 (stationary phase) 互相作用,使混合物所含成分在系統內有不同的流速,而達到分離的目的。

離子層析

離子層析 (Ion Chromatography)
國立臺灣師範大學化學系博士生 林欣慧

層析1方法分很多種,如傳統的氣相、液相層析2,或新發展、具有高度選擇性的親和層析3,而現在將要介紹的離子層析法4-6便是屬於親和層析的一種。

離子層析儀是用來分析水溶液中所存在的陰、陽離子,廣泛的應用在工業上產品品質檢測、水質檢測(如檢測水消毒的無機副產物:次氯酸根 $$\mathrm{ClO_2^-}$$、過氯酸根 $$\mathrm{ClO_3^-}$$、過溴酸根 $$\mathrm{BrO_3^-}$$ 等)。

親和層析

親和層析 (Affinity chromatography)
國立臺灣師範大學化學系研究生 陳培杰

一般的管柱層析(Column chromatography)可分為氣相層析(Gas chromatography)和液相層析(Liquid chromatography),如果要再細分,可分為氣液相層析、氣固相層析……等,還有幾種比較特別的層析方法,像是利用離子交換層析法或者利用是孔徑大小不同達到分離效果的層析,本篇要介紹的親和層析也是比較特殊類的層析。

液相層析

液相層析(Liquid Chromatography)
國立臺灣師範大學化學系碩士班二年級 翁于婷

層析法是常見且普遍,可將複雜的混合物分離純化的方法。以層析系統的動相分類,主要有氣相層析與液相層析等等1,而液相層析法適用於純化大部分的化合物。

液相層析利用動相 (mobile phase) 和靜相 (stationary phase) 的交互作用,當混合物進入系統內時,不同成分的特性將決定物質在層析管柱內流動的快慢,再利用各成分移動速率之不同來分離2。液相層析儀最主要就是「動相式液體」,所以在液相層析法裡又有:液固層析法 (LSC) 和液液層析法 (LLC)。

液固層析法 (LSC) 或名為吸附層析法,是靜相為細粒固體之表面,溶質與沖提劑競爭固體表面的吸附面積,最適合拿來分離低極性的有機物,也就是最常被使用的高效率液相層析 (HPLC, High-performance liquid chromatography) 的原理3。在這兩相中,通常極性較大的液體會固定吸附在靜相的惰性載體上,而極性較小的液體溶劑則會被當作移動相、極性小的物質先流出,此時稱為「正相層析」(normal phase adsorption)。反之靜相吸附的液體極性小甚至是非極性液體,而移動相為極性液體、極性大的物質先流出,則稱為「逆向層析」(reverse phase adsorption)。

薄層色層分析 ─ 下

薄層色層分析 (Thin Layer Chromatography, TLC) ─ 下
國立竹北高級中學生物科張雅菱老師/國立臺灣師範大學生命科學系張永達副教授責任編輯

請參閱薄層色層分析 (Thin Layer Chromatography, TLC)-上

與固定相親和力較差(與流動相極性較為相似)的物質將會被帶到薄片較上方的位置;反之,與固定相親和力較大(固定相極性較為相似)的物質將不容易被流動相帶動而停留在較下方的位置,也因此樣本內的物質將可依據其極性而被分離開來。

當展開劑移動到薄片(固定相)的最上方時,將薄片自容器中取出並晾乾。若分離的物質是有顏色的,則可以肉眼在薄片上看出顏色;但大部分的物質是沒有顏色的,可利用紫外光 (UV light) 照射,或其他合適的染色方法使其顯現位置。

自起點處到最後停留位置間的距離與展開劑可移動之最大距離的比值,我們稱為Rf值 (retention factor value)。透過Rf值的計算,我們就可以知道樣本內各種化合物的極性,亦可進一步將薄片上的矽膠或礬土給刮除下來,作進一步的純化以便鑑定分析此化合物的成分。

薄層色層分析 ─ 上

薄層色層分析 (Thin Layer Chromatography, TLC) ─ 上
國立竹北高級中學生物科張雅菱老師/國立臺灣師範大學生命科學系張永達副教授責任編輯

色層分析法 (chromatography) 是一種常用來辨別化合物和確定物質純度的方法。這套系統最主要的兩個組成是固定相 (stationary phase) 和流動相 (mobile phase),分別有不同的極性或非極性的強度,也因此與樣本(欲分離的混合物)間有不同的親和力。

若樣本與固定相間的親和力大於與流動相的親和力,則容易滯留在原處;反之,則容易隨著流動相移動,藉此達到分離的目的。

依據固定相、流動相是固態、液態或氣態,又可分成許多不同的色層分析法。其中薄層色層分析 (Thin layer chromatography, TLC) 即是一種以固態物質為固定相,液態物質為流動相的分析方法。